近年來，創(chuàng)傷弧菌造成的感染事件時(shí)常發(fā)生。創(chuàng)傷弧菌已被列為海產(chǎn)品相關(guān)的一種重要病原菌，并已躋入弧菌三大病原菌之一。我國關(guān)于弧菌的檢測標(biāo)準(zhǔn)主要有《GB 4789.7—2013 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 副溶血性弧菌檢驗(yàn)》、《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)   食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 創(chuàng)傷弧菌檢驗(yàn)（征求意見稿）》（2017年10月發(fā)布）等。

2017年，ISO更新了弧菌的檢測標(biāo)準(zhǔn)，即ISO 21872-1-2017 食品和動(dòng)物飼料微生物學(xué) 潛在腸道致病性弧菌屬檢測的水平方法 第1部分:副溶血性弧菌、霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌的檢測。該標(biāo)準(zhǔn)取代了2007年舊的版本，主要變化是引入了可選擇的弧菌的分子鑒定方法（包括副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌、霍亂弧菌），并在附錄E上增添了方法評(píng)價(jià)。但實(shí)際上，檢測方法上，ISO和我國標(biāo)準(zhǔn)還有一些不一樣的地方。

ISO指出，對增菌孵育溫度的調(diào)整，可改善食品中弧菌的回收率。例如，在新鮮產(chǎn)品中，增菌時(shí)孵育41.5℃可使副溶血性弧菌和霍亂弧菌的回收率提高。在冷凍食品（-18℃以下）或腌制食品中，創(chuàng)傷弧菌、副溶血性弧菌和霍亂弧菌的增菌溫度在37℃可使回收率提高。因此，在增菌環(huán)節(jié)，ISO推薦的增菌液堿鹽蛋白胨水（ASPW）的孵育溫度為41.5℃或37℃，6h。如果在冷凍或腌制品中三種菌都測，則是在37℃孵育。如果只測創(chuàng)傷弧菌（不論食品類型），也是37℃孵育。如果在新鮮食品中只檢測副溶血性弧菌或霍亂弧菌，則增菌溫度為41.5℃。

ISO還推薦了二次增菌，也是用ASPW，原則同上。分離菌則推薦同時(shí)采用TCBS和另一種選擇性固體培養(yǎng)基。對于陽性菌落，驗(yàn)證可采用生化試驗(yàn)或PCR、qPCR。生化試驗(yàn)包括賴氨酸脫羧、精氨酸二氫化酶試驗(yàn)，-半乳糖苷酶試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)等。

世界微生物產(chǎn)品供應(yīng)商HiMedia公司開發(fā)的HiCrome弧菌顯色培養(yǎng)基（貨號(hào)MV1682），可同時(shí)分離鑒別副溶血性弧菌和霍亂弧菌。該顯色培養(yǎng)基為高（堿性）pH，有助于選擇性分離弧菌屬。它根據(jù)細(xì)菌β-半乳糖苷酶和培養(yǎng)基中所包含底物反應(yīng)的原理，霍亂弧菌菌落呈紫色，副溶血性弧菌菌落呈藍(lán)綠色（見下圖）。

該弧菌分離培養(yǎng)基用植物蛋白胨取代動(dòng)物蛋白胨，更加環(huán)保，也避免了瘋牛病風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)*同類進(jìn)口產(chǎn)品。對于陽性菌落，還可進(jìn)一步用HiMedia公司生產(chǎn)的弧菌生化鑒定條（貨號(hào)KB007）來鑒定。該鑒定條包含了12種傳統(tǒng)的生化試驗(yàn)，包括伏普試驗(yàn)、精氨酸脫羧試驗(yàn)、鹽耐量試驗(yàn)（1%）、ONPG試驗(yàn)

、檸檬酸鹽利用試驗(yàn)、鳥氨酸脫羧試驗(yàn)、甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)等，操作方便，結(jié)果準(zhǔn)確，可鑒定28種弧菌，具體如下：

河口弧菌（V. aestuarianus）

溶藻弧菌（V. alginolyticus）

坎氏弧菌（V. campbellii）

鯊魚弧菌（V. carchariae）

霍亂弧菌（V. cholerae）

辛辛那提弧菌（V. cincinnatiensis）

雙氮養(yǎng)弧菌（V. diazotrophicus）

費(fèi)氏弧菌（V. fischeri）

河流弧菌（V. fluvialis）

弗尼斯弧菌（V. furnissii）

產(chǎn)氣弧菌（V. gazogenes）

哈維氏弧菌（V. harveyi）

霍氏弧菌（V. hollisae）

火神弧菌（V. logei）

地中海弧菌（V. mediterranei）

麥?zhǔn)匣【╒. metschnikovii）

擬態(tài)弧菌（V. mimicus）

飄浮弧菌（V. natriegens）

沙蠶弧菌（V. nereis）

黑美人弧菌（V. nigripulchritudo）

病海魚弧菌（V. ordalii）

東方弧菌（V. orientalis）

副溶血性弧菌（V. parahaemolyticus）

解蛋白弧菌（V. proteolyticus）

殺鮭弧菌（V. salmonicida）

燦爛弧菌（V. splendidus）

塔氏弧菌（V. tubiashii）

創(chuàng)傷弧菌（V. vulnificus）

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在微生物培養(yǎng)和檢測領(lǐng)域，一如既往地為您帶來的服務(wù)。